陈晓琴1 刘昌良2
犬细小病毒病(Canine parvovirus infection)又称病毒性肠炎、传染性肠炎,它是由犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)引的接触性、急性、高致死性传染病,主要临床表现为出血性肠炎和心肌炎[1]。
犬细小病毒于1977年首先在美国被发现,1978年,澳大利亚的Kelly和加拿大的Thomson等同时从患肠炎的病犬粪便中分离获得的犬细小病毒(CPV)。为了区别于1967年由Binn等人从健康犬粪便中分离到的犬极细小病毒(习惯也上被叫做CPV-1)而将后来发现的病毒命名为犬细小病毒2型(CPV-2)。
在我国,梁士哲等于1982年首次报道了类似犬细小病毒感染性肠炎,1983 年证实有本病的流行[1、3]。近年来,随着我国军警犬、导盲犬和宠物犬饲养量的大幅增加,犬细小病毒感染日趋严重,已成为危害养犬业重大疫病之一。本文通过对其病原、流行病学及临床症状的进行分析和对诊疗进行总结,浅谈诊疗体会,以期为诊治犬细小病毒病提供参考。
1.1犬细小病毒病的病原特点、流行病学及临床症状
CPV属于细小病毒科、细小病毒属。CPV具有较强的血凝活性,病毒在4℃和25℃都能凝集猪和恒河猴的红细胞,但不能凝集其它动物的红细胞,这一特性可作为病毒鉴定的参考指标[1、2]。CPV结构坚实致密,对外界理化因素抵抗力非常强。粪便中的CPV可存活数月至数年,室温下可存活90天,在pH值3~9和56℃条件下至少能稳定1小时。紫外线、福尔马林、β-丙内酯、次氯酸钠、氨水和氧化剂等能使之灭活,但CPV对乙醚、氯仿、醇类和去氧胆酸盐有抵抗力[3、7、8]。
CPV主要感染犬,各种年龄、性别和品种的犬均易感染,但小犬的易感性高,断奶后的子犬易感性最高,其发病率和死亡率都高于其他年龄组,往往以同窝暴发为特征。3~4 周龄犬感染后以急性致死性心肌炎的为多,8~10 周龄的犬则以肠炎为主,小于4周龄的子犬和大于5岁的老犬发病率低[1,3]。王景秋等调查发现本病多发于小型宠物犬,且以洋种犬为多,2~5月龄为高发病期,本病全年均有发生,但相对集中在2~6 月份[10]。饲养管理条件骤变、长途运输、寒冷拥挤等均可促使本病发生。感染犬是本病的主要传染源,感染后4天通过粪便等向外界排毒而感染健康犬低;康复犬也可作为传染源,仍可长期通过粪便排毒,这也是本病能广为流行的原因之一。
潜伏期一般为7~14天。主要临床症状:多数呈肠炎型,少数呈心肌炎型,也有在1 个犬身上兼有 2 型症状的报道。CPV还经常与其他病毒,特别是与引起肺病变的犬瘟热一起形成混合感染[1,3,6,8]。
肠炎型多见于青年犬,特征症状是呕吐、腹泻、便血,白细胞显著减少,在病程的早、中、晚期表现各不相同。早期:多数犬体温升高达40℃~41℃,少数犬体温正常,精神不振,采食量减少或绝食,呕吐食物及黄白色泡沫状液体,排便次数增多,大便正常或稍带黏液,1~2天后进入中期症状。中期:食欲废绝,频繁呕吐和剧烈腹泻,多数犬呈喷射状排出番茄汁样粪便,带有血液,发出特别难闻的腥臭味,少数犬黏液便呈黄色或乳白色果冻样;极少数犬呈间歇性腹泻。后期:病犬迅速脱水,眼窝下陷,皮肤弹性降低,可视黏膜苍白,舌面皱缩,最后因水、电解质平衡失调,并发酸中毒而于数小时至2天死亡。病程短的4~5天,长的1周以上。成年犬发病一般不发热[1、8、11、13]。血液学检查发现,白细胞总数明显减少,尤其在发病后4~5天最为明显,常降至3000 个/ml 以下。如果继发感染,白细胞总数可增高[7、13]。
心肌炎型多见于流行初期或缺乏母源抗体的4~6周龄幼犬。发病初期精神尚好或仅有轻度腹泻,个别病例有呕吐。常突然发病,表现为可视黏膜苍白、衰弱、呻吟、干咳,呼吸极度困难。听诊时心有杂音,心率不齐。心电图R波降低,S-T波升高。常因急性心力衰竭而死亡,只有极少数轻度病例可以治愈,致死率为 60%~100%[1,3,7,8]。
目前国内外对犬细小病毒病的诊断已开展大量研究,常用诊断方法有实验室诊断和试剂盒结合临床症状进行快速诊断等。
根据王居平等犬细小病毒实验室研究进展报道,实验室诊断法主要有:血凝试验(HA)、血凝抑制试验(HI)、血清中和试验(SN)、免疫扩散试验、酶联免疫吸附试验(ELISA)、间接 ELISA 检测法、竞争性抑制 ELISA试验、双抗体ELISA法、复合物捕获阻断 ELISA(Ctb-ELISA)、限制酶分析法、快速薄膜免疫迁移技术、乳胶凝集试验(LAT)、荧光抗体试验、聚合酶链式反应(PCR)法、单克隆抗体(McAb)分析法、一步免疫色析试验、核酸探针技术、核酸杂交技术、对流免疫电泳法、核内包涵体的检查、病毒分离鉴定、电镜检查等方法[5]。
CPV 试纸诊断严格地说也是实验室诊断的方法之一,因其使用方便并临床诊断中广泛应用而在此专述,其诊断的原理是利用可以与CPV特异性反应的两种单克隆抗体。一种单克隆抗体固定在硝基纤维膜中,另一种抗体以胶体金形式存在。如果检测样品中存在CPV,CPV抗原首先与抗-CPV单克隆抗体胶体金反应通过毛细管现象在薄膜中移动,最终与固定在硝基纤维膜中的另一种抗CPV单克隆抗体结合显示出红色色带。
诊断方法是用含有疑似细小病毒感染的病犬肛门内粪便的液体,加入试纸的样品孔,5—10分钟后进行判断。判断方法:只有对照线(C)呈红色或者紫色线时,表示没有感染细小病毒;检测线(T)与对照线(C)均呈红色或紫色时,表示已经感染细小病毒。
宋永奇等通过对犬细小病毒抗原快速检测试剂盒与血凝/血凝抑制(HA/HI)试验和PCR法诊断结果进行比较认为:HA/HI法具有较高的特异性,但敏感性较低;PCR具有高度敏感性和特异性,但不适合临床推广;细小病毒抗原快速检测试剂盒,在正确操作下结果可靠,是临床诊断犬细小病毒感染的首选方法[14]。
细小病毒试纸或试剂盒目前国内外都有生产,根据目前重庆市场应用情况,主要以进口为主,如韩国安捷。检测方法及步骤,首先用生理盐水沾湿的棉签从直肠或从新鲜粪便中直接取样。然后将棉签侵入装有稀释液的试管,充分搅拌混匀后,用一次性滴管取上清液。取出试纸,开封后平放在桌面,从滴管中缓慢而准确地逐滴加入3-5滴。加样品液后,约30秒内,液体从靠样品孔的观察窗边缘涌出,朝另一方向流动。5-10分钟后判断结果。呈现一条红线为阴性,两条红线为阳性。目前国内大多数宠物医院均采用细小病毒试纸或试剂盒对犬细小病毒病进行快速诊断,因其结果准确性高,检测速度快,为及时治疗犬细小病毒病赢得了宝贵时间,对治疗犬细小病毒病有着非常重要的意义。
犬细小病毒病的主要临床表现是呕吐、腹泻、便血和心肌炎,目前尚无有效的特异性治疗药物。治疗原则是对症治疗,止吐、止泻、止血、补液、调节电解质平衡、强心及控制继发感染等,主要治疗方法有对症治疗、特异治疗、支持治疗等。
(1)止吐、止泻
止吐、止泻有利于减少体液流失,缓解患病犬的痛苦。常用止吐药物有654-2,爱茂尔,维B6,阿托品;止泻药物有鞣酸蛋白,施密达,但因病犬常常呕吐,不适宜口服给药,用施密达深部灌肠效果较好。
(2)止血
止血有利于减少病犬血液丢失,减小因失血导致的病情加重。常用肾上腺色腙、氨甲苯酸、氨甲环酸、VK3、VK1等止血,肌注效果不理想,采用联合肌注或静滴止血敏、氨甲苯酸有较好的疗效。如果这些方法止血无效,可静滴立芷血、卡络磺钠。另外血浆、代血浆也有止血作用。心功能不全者,可静滴生脉注射液;肌注VB12,肌苷等。
(3)控制心肌炎症
及时用抗生素或磺胺类药物治疗心肌炎症。如先锋霉素,肌注或和10%葡萄糖注射液静滴。磺胺嘧啶钠静注;
促进心肌代谢可用 ATP、CoA、肌苷、Vc、10%葡萄糖注射液30ml/千克体重,混合静注。
加强护理 让患犬保持安静,避免过度兴奋或运动,呼吸困难时,可输氧;尿少而水肿明显的犬,可用利尿剂。根据心肌炎的发展阶段,用不同的药物治疗:病初,不宜用强心剂,以免心脏兴奋,可在心区凉敷;发展到心衰时,可用20%安钠咖1-2毫升皮下注射,6小时1次。25%葡萄糖注射液静注,对心肌炎有良好作用;心力衰竭时 除用上述强心剂外,可将0.1%肾上腺素0.3-0.5毫升混于5-20%葡萄糖中,缓慢静注;特别注意,不要用洋地黄制剂。
(4)控制继发感染
由于白细胞减少,肠上皮细胞损伤,大肠埃希菌和产气夹膜梭状芽孢杆菌容易造成病犬的继发感染,故应使用抗菌素。一般采取联合用药,氨苄青霉素(或头孢唑啉或头孢拉定)+拜有利,但喹诺酮类会引起幼犬软骨发育异常,幼犬应慎用。如果患犬呕吐减轻或不呕吐,可用微生态制剂。
微生态制剂,是一种可通过改善肠道平衡而对动物施加有利影响的活的直接饲喂的微生物饲料添加剂,它形成菌群屏障,保护肠道组织,防止治病菌侵入。双歧杆菌、乳酸菌在肠道中生长繁殖的同时产生酸性物质,降低肠道pH值,不利于有害菌生长繁殖[13],从而达到控制有害菌引起的继发感染。
发病早期使用细小病毒单克隆抗体[9]、干扰素、免疫球蛋白[15]、血浆有一定疗效。单克隆抗体用量,1~2ml/kg体重,肌肉注射,每天一次,连用5~7天。干扰素,成犬每日肌注1~2支,(每支200万单位)。连续3~5天。免疫血浆,10~20ml/kg体重,静滴,每天1次,连用3~5天。血浆和单抗和干扰素联合使用,效果更佳。
(1)补液:对脱水病犬非常重要且必不可少,每天至少输液一次,必要时每天输两次,连续输液5~7天,所需液体量=已丢失量+ 当日生理需要量+当日丢失量[13]。
已丢失液体量按体重百分比计算:重度脱水,幼犬10~15%,成犬8%;中度脱水,幼犬5~10%,成犬4~8%;轻度脱水,幼犬 2~5%,成犬2%[13]。
当日生理需要量,按成犬30~40ml/kg体重/天,幼犬80~90 ml/kg体重/天,二月龄以下犬100~150 ml/kg体重/天计算[13]。
(2)调节电解质平衡
当病犬表现严重呕吐、腹泻时需纠正脱水、电解质紊乱和酸碱平衡。
1)补钾:缺钾的典型症状:精神淡漠,肌肉软弱无力,疼痛,不愿行走或瘫痪。凡禁食3日以上者均应补钾。但在脱水酸中毒的情况下,为防止产生高血钾症,最好先适量输入生理盐水或5%葡萄糖液,待尿量增多,患犬开始排尿后再补钾较为安全。
犬的钾需要量按0.1~0.2g/kg体重/天计算,分2~3次补充。补钾时,要控制稀释浓度和速度,其浓度一般不超过0.3%。输钾的速度不能太快,缺钾较重犬可分数日补足,不可一日补完,以免发生高血钾症[13]。如病犬不呕吐时,口服补钾更安全。
2)补碳酸氢钠:病程末期,因病犬长期不进食,加上本身消化液和体液大量丢失,大多数病犬都可能引起酸碱平衡率乱,出现酸中毒,其症状:病犬倦怠,呼吸加快加深、呼出的气体有醋酮味(烂苹果的气味),测尿液呈酸性,四肢抽搐,呆立,昏睡。
方法:静脉滴注5%碳酸氢钠,2-5ml/kg体重,在疾病后期,输液时加入适量碳酸氢钠,对促进病犬康复及恢复食欲是非常有益的。
3)补钙:在纠正酸中毒过程中如能静脉滴注10%葡萄糖酸钙,常能防止低钙抽搐的发生。剂量是1~2ml/kg体重。钙不能与碳酸氢钠混合滴注,以防产生碳酸钙沉淀。
(3)补充营养:对体质虚弱者,可静脉注射氨基酸。失血较多者,输血效果好。
通过对重庆名望宠物医院2010年7月1日到2011年6月30日期间的细小病毒病例的治疗观察,本病无明显的季节性,一般冬、春季多发,8~l2周龄幼犬最易感,完成免疫的犬发病率明显降低。气候骤变、环境卫生条件差或并发其他疾病时,可加重病情而导致死亡。用犬细小病毒检测试纸检测结合临床症状和血液分析共确诊犬细小病毒病246例,死亡37例,死亡率约15%。从临床治疗结果分析,心肌炎型病例大多数转归不良,有时来不及治疗就发生死亡。肠炎型病例因发现早,及时确诊,并经过系统的治疗,治愈率一般80-90%。治疗中,给新生犬保温、给予适当的营养和水分可大大降低死亡率。从治疗效果看,早发现病情、及时确诊、尽早治疗,能提高该病的治愈率。
因为本病引起严重的呕吐、腹泻,可使体内的水分及电解质大量丢失,不能通过进食补充营养和水分,最后因脱水、电解质平衡失调,并发酸中毒而于数小时至两天内死亡,因此,静脉补液、补充能量、补钾、补碱、补钙等是非常重要的。
该病病程长达6~9天,一般呕吐症状会持续4~5天,即使用止吐药也未必能迅速消除呕吐症状,应坚持治疗,切勿轻易放弃;一些病例常在通过2~3天治疗,病情有所好转后而中断治疗,易造成复发,使病程延长或转为晚期症状。从名望宠物医院的治疗情况看,坚持治疗的成活率高。
由于胃肠道炎症,进食会导致更严重的呕吐,因此,呕吐症状未消除之前,一般不进食,不宜使用口服药物。不呕吐后禁食 48~72小时,然后喂容易消化的食物,少吃多餐,逐渐恢复到正常饮食。
细小病毒病是由病毒感染引起,没有特效药物可以治疗,虽然经治疗后成活率较高,但花费较大。免疫接种是预防本病的根本措施。使用犬五联或六联弱毒疫苗时,一般可在6周龄时注射小犬二联疫苗(此疫苗可突破母源抗体的干扰),10周龄时注射五联或六联苗,对30~90日龄的犬应注射3次,90日龄以上的犬注射2次即可,每次间隔为2~4周。每次注射1个剂量,以后每半年加强免疫1次[16]。进口疫苗的免疫期可达九个月到一年。
CPV对紫外线,福尔马林,次氯酸钠,氧化剂敏感。因此,在犬细小病毒病流行季节,及时用福尔马林、β-丙内酯、紫外线、2~4%烧碱、10~20%漂白粉消毒笼舍、环境也至关重要。
无论是国产苗还是进口苗,其免疫效果并非100%,即使是免疫接种过细小病毒疫苗的犬只,也可能患细小病毒病。 因此,平时加强饲养管理,搞好清洁卫生,减少到犬市场的次数,减少感染病毒的机会,对预防细小病毒病非常重要。对已感染细小病毒的病犬注意保暖,腹泻期间应停喂牛奶、鸡蛋、肉类等高蛋白、高脂肪性食物,给予易消化的食物,以减轻胃肠负担,及时到正规宠物医院治疗,可提高治愈率。
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